1，25-二羟维生素D3通过调控lncRNA TUG1和NF-κB通路改善软骨细胞炎症反应

摘要:

目的 探讨1，25-二羟维生素D3[1，25（OH）2D3]对长链非编码RNA（LncRNA）牛磺酸上调基因（TUG1）表达以及NF-κB信号通路活化对炎症反应的影响。方法 体外培养人软骨肉瘤 SW1353细胞，随机将细胞分为对照组（加入等体积的溶剂）、VD3组[加入10 nmol/L的1，25（OH）2D3溶液]、白介素-1β（IL-1β）处理组（加入10 ng/ml的IL-1β溶液，构建炎症模型）、VD3干预组[加入10 ng/ml的IL-1β和10 nmol/L的1，25（OH）2D3溶液]、靶向lncRNA TGU1的shRNA沉默组（转染质粒48 h后加入10 ng/ml的 IL-1β溶液）。CCK-8检测细胞活力，荧光定量PCR检测lncRNA TUG1和炎症[白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）]相关基因的表达，Western Blot分析NF-κB信号通路相关蛋白[核因子κB亚基p65（NF-κB p65）和核因子κB抑制蛋白（IKBα）]以及磷酸化水平。结果 与对照组相比，IL-1β处理组细胞活力明显降低；lncRNA TUG1、TNF- 和 IL-6 基因 mRNA 表达上调；NF- B p65 和 IKB蛋白的磷酸化水平升高（均P＜0.05），提示炎症模型构建成功。与 IL-1β处理组相比，VD3干预组细胞活力增加；lncRNA TUG1、TNF-α和IL-6基因mRNA表达下调；NF-κB p65和IKBα蛋白的磷酸化水平下降（均P＜0.05）。与IL-1β处理组相比，shRNA沉默lncRNA TUG1的表达可抑制IL-1β诱导的TNF-α和IL-6基因mRNA表达上调；NF-κB p65和IKBα蛋白的磷酸化水平明显降低（均P＜0.05）。结论 1，25（OH）2D3可以改善 IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应，可能是通过抑制 LncRNA-TUG1和NF-κB信号通路所介导的。

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