靶向敲低Piezo1来源外泌体促进缺氧环境下骨关节炎修复的实验研究

摘要:

目的 探讨缺氧微环境刺激联合靶向敲低鼠源骨髓间充质干细胞（BMSCs）内Piezo1蛋白分泌的外泌体对骨关节炎（OA）修复的影响。方法 以慢病毒为媒介，将si-Piezo1沉默质粒转染BMSCs，同时设置低氧环境处理si-Piezo1+BMSCs，提取外泌体。利用甲苯胺蓝染色，RT-qPCR和Western blot法检测BMSCs成软骨分化。通过手术方法构建SD大鼠的OA模型，并分为si-Piezo1组（膝关节注射si-Piezo1来源外泌体）、缺氧+si-Piezo1组（膝关节注射低氧环境处理si-Piezo1来源外泌体）、模型组（膝关节注射等量PBS）及对照组。采用免疫组织化学染色，苏木精-伊红（HE）染色，番红-固绿染色进行病理学评估，并根据改良 Minkin’s评分和国际骨关节炎研究学会（OARSI）评分量化检测结果。结果 甲苯胺蓝染色显示，缺氧+si-Piezo1组的染色阳性细胞数明显多于si-Piezo1组。Western-blot和RT-qPCR结果表明缺氧+si-Piezo1组的聚集蛋白多糖（Aggrecan）和II型胶原蛋白（Collagen II）的表达量均高于si-Piezo1组（均P＜0.05）。4组改良 Minkin’s评分、OARSI评分差异均有统计学意义（F=16.82、22.79，均P＜0.05），缺氧+si-Piezo1 组修复效果均优于si-Piezo1组、模型组（均P＜0.05）。结论 缺氧微环境刺激联合 si-Piezo1 转染 BMSCs 来源外泌体可以促进OA的修复效果。

Abstract: