骨髓间充质干细胞来源的外泌体对缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

摘要:

目的 探讨骨髓间充质干细胞来源外泌体（BMSCs-Exo）对缺氧/复氧（H/R）诱导的肾小管上皮细胞（HK-2）损伤的保护作用及其分子机制。方法 外泌体试剂盒提取BMSCs-Exo，透射电镜观察其形态，Western blot检测外泌体表面特异性标志蛋白，采用PHK67绿色荧光标记外泌体并观察HK-2细胞摄取现象。将HK-2细胞分为对照组（NC）、正常组+外泌体组（Exo）、H/R诱导组（H/R）、H/R+外泌体组（H/R+Exo），采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡，活性氧（ROS）荧光法测试盒检测ROS水平，氧化应激相关检测试剂盒测定丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量。 qRT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测细胞自噬标志蛋白Beclin1的表达水平。结果 成功获得BMSCs-Exo并观察到它可被HK-2细胞摄取。与NC组相比，H/R组HK-2细胞活力、GSH水平显著降低，而凋亡率、ROS、MDA水平显著升高（均P＜0.05）；与H/R组相比，H/R+Exo组细胞活力、GSH水平则显著增强，凋亡率、ROS、MDA水平下降（均P＜0.05）；与NC组相比，H/R组Beclin1表达升高，在H/R组加入外泌体后，H/R+Exo组Beclin1表达显著降低（均P＜0.05）。结论 BMSCs-Exo能通过上调Beclin1改善H/R诱导的HK-2的损伤。

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