卡马西平减轻 HT22 细胞炎性损伤及机制研究

摘要:

目的 探究卡马西平减轻脂多糖（LPS）诱导小鼠海马神经元（HT22）细胞炎性损伤的作用效果及机制。方法 以 HT22 细胞为研究对象，体外传代培养，以 10、20、50 g/ml LPS 进行试验，确定 LPS 对 HT22 细胞作用最佳浓度；将 HT22 细胞分为对照组（NC 组，正常培养），LPS 组（加入 20 g/ml LPS 进行培养），LPS+卡马西平组（加入20 g/ml LPS 和 50 g/ml 卡马西平进培养）3 组，以 CCK-8 实验、DAPI 染色法检测 HT22 增殖抑制率及凋亡率；采用 H2DCFH-DA 试剂盒检测细胞内活性氧（ROS）含量，酶联免疫吸附（ELISA）法检测 HT22 细胞上清液白细胞介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）及白细胞介素-17（IL-17）水平，Western blot法检测HT22细胞 NOD 样受体蛋白 3（NLRP3）信号通路相关蛋白表达。结果 20 g/ml LPS 作用于 HT22 细胞 48 h，细胞增殖抑制率接近于 50%。LPS 组、LPS+卡马西平组细胞活性均低于 NC 组（均P＜ 0.05），LPS+卡马西平组细胞活性高于 LPS 组（P＜ 0.05）。LPS 组、LPS+卡马西平组细胞凋亡率均高于 NC 组（均P＜ 0.05），LPS+卡马西平组细胞凋亡率低于 LPS 组（P＜ 0.05）。3 组 ROS 差异有统计学意义（P＜ 0.05），LPS 组＞ LPS+卡马西平组＞ NC 组（均P＜ 0.05）。LPS组、LPS+卡马西平组HT22 细胞上清液IL-1 、TNF-α 、IL-8 及IL-17 水平均高于NC组（均P＜ 0.05），而 LPS+卡马西平组上述因子水平均低于 LPS 组（均P＜ 0.05）。Western blot 结果显示：与 NC 组相比，LPS 组、LPS+卡马西平组 HT22 细胞中 NLRP3、IL-1、凋亡相关微粒蛋白（ASC）及 pro-caspase1 表达均显著上调（均P＜0.05），而与 LPS 组相比，LPS+卡马西平组上述因子的表达均显著下调（均P＜ 0.05）。结论 卡马西平可通过介导 NLRP3 信号通路来调节细胞活性和细胞凋亡的平衡，进而减轻 LPS 诱导的 HT22 细胞的炎性损伤。

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