miR-23家族在脂多糖诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤中的作用

摘要:

目的 研究微小RNA（miR）-23 家族在脂多糖（LPS）诱导的人肾小管上皮HK-2 细胞损伤中的作用及机制。方法 培养人肾小管上皮HK-2 细胞，将细胞分为对照组（给予不含药物的培养液）、LPS组（给予含 1 mg/L LPS的培养液）、LPS+miR-NC组（转染NC模拟物 6 h后更换为含有1mg/L LPS的培养液）、LPS+miR-23a组（转染miR-23a模拟物 6 h 后更换为含有 1mg/L LPS 的培养液）。采用荧光定量 PCR 检测 miR-23a、miR-23b、miR-23c 的表达，双荧光素酶报告基因实验检测 miR-23a 靶向 TAK1 结合蛋白 3（TAB3），CCK-8 法检测细胞存活率，Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率，ELISA法检测白细胞介素 1（IL-1 ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素 6（IL-6）的含量，Western blot 法检测 TAB3、核因子 B（NF-kB）、B 细胞淋巴瘤 2（Bcl-2）、Bcl-2 相关 X 蛋白（Bax）的表达水平。结果 LPS 组 HK-2 细胞的 miR-23a、Bcl-2 表达水平，存活率均低于对照组；凋亡率、IL-1 、TNF-α、IL-6 含量，Bax、TAB3、NF-kB 表达水平均高于对照组（均P＜0.05），miR-23b、miR-23c 的表达水平与对照组差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）。miR-23a 使野生型 TAB3 报告基因的活性降低。LPS+miR-23a 组 HK-2 细胞的 miR-23a、Bcl-2 表达水平，存活率高于LPS+miR-NC组；凋亡率，IL-1、TNF-α、IL-6含量，Bax、TAB3、NF-kB表达水平低于LPS+miRNC组（均P＜0.05）。结论 miR-23 家族中 miR-23a 表达降低与 LPS 诱导 HK-2 细胞损伤有关，相关的分子机制是靶向 TAB3/NF-kB途径并抑制炎症反应、细胞凋亡。

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