胰腺肿瘤细胞中音猬因子调控诱导巨噬细胞极化的机制研究
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    【摘要】目的 探讨胰腺肿瘤细胞中音猬因子(Shh)调控诱导巨噬细胞极化的作用机制。方法 收集胰腺肿瘤组织和癌旁组织,免疫组化检测 Shh 表达水平;分析 TCGA 数据库中 Shh 表达差异与胰腺肿瘤患者预后的关系;体外共培养胰腺肿瘤细胞与巨噬细胞(RAW 264.7),流式细胞术鉴定巨噬细胞极化,Western blot实验检测Shh蛋白达水平,RT-qPCR实验检测Shh、一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA 相对表达量;将共培养细胞分为空白对照组、阴性对照组、Shh 组和 Shh-RNAi 组,分别感染慢病毒载体调控 Shh 表达,检测上述相同项目,并采用 Western blot 和 RT-qPCR 实验分别检测干扰素调节因子(IRF)4、IRF5 表达水平。结果 免疫组化结果显示,胰腺癌组织 Shh 阳性细胞率显著高于癌旁组织(P<0.05);TCGA 数据分析结果显示,胰腺癌患者Shh表达显著高于正常对照(P<0.05),Shh低表达与患者远期生存率提高相关(P<0.05);与正常 RAW264.7 细胞比较,胰腺肿瘤共培养 RAW264.7 细胞 Shh 蛋白表达量、Shh、iNOS、Arg-1 mRNA 相对表达量及巨噬细胞 M2/M1 比例均升高(均P<0.05);与空白对照组和阴性对照组比较,Shh 组 Shh、IRF4 蛋白、mRNA 相对表达量、Arg-1 mRNA 相对表达量上调,M2/M1 比率升高,IRF5 蛋白、mRNA 相对表达量、iNOS mRNA 相对表达量下调(均P<0.05);与 Shh 组比较,Shh-RNAi 组 Shh、IRF4 蛋白、mRNA 相对表达量、Arg-1 mRNA 相对表达量下调,M2/M1 比率均降低(均P<0.05),IRF5 蛋白、mRNA 相对表达量、iNOS mRNA 相对表达量上调(均P<0.05)。结论 胰腺肿瘤细胞中 Shh 呈高表达,过表达 Shh 具有促进M2 型巨噬细胞极化、抑制M1 型巨噬细胞极化的作用,可能是通过调控IRF4、IRF5 蛋白和基因表达实现。

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引用本文

黄友泽,陈以勒,姜跃炜,赵春.胰腺肿瘤细胞中音猬因子调控诱导巨噬细胞极化的机制研究[J].现代实用医学,2024,36(4):433-437.

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  • 在线发布日期: 2024-05-15
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