体外不同条件诱导 L02 肝细胞损伤模型的构建

摘要:

目的 探讨不同条件下诱导 L02 肝细胞损伤的最佳条件，建立稳定可靠的体外肝细胞损伤模型。方法 将常规培养的L02 细胞分别设置为正常对照组、过氧化氢（H2O2）组、对乙酰氨基酚（APAP）组和乙醇组；H2O2 组用不同浓度梯度（300、400、500 和 600 mol/L）的H2O2 分别诱导 6、12 和 16 h；APAP组以不同浓度梯度（1、10、20 和 40 mmol/L）分别诱导 3 和 6 h；乙醇组加入不同浓度梯度（0.5%、1%、1.5%和 2%）的乙醇分别孵育 6 和 24 h；在上述损伤条件下用细胞计数试剂盒（CCK）-8 检测各组 L02 细胞的存活率。在确定的最佳损伤条件下，建立不同肝损伤模型，检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）等损伤指标。结果 除 300 mol/L H2O2 诱导 12 h 以外，其余不同浓度H2O2 组的细胞存活率均低于正常对照组（均P＜0.05）。不同浓度 APAP 组的细胞存活率均低于正常对照组（均P＜0.05），尤其是 40 mmol/L 的 APAP 更为明显。乙醇诱导 6 h 后，不同浓度乙醇组的细胞存活率均明显下降，1.5%和 2%乙醇的细胞存活率均低于正常对照组（均P＜0.05）；此外，不同浓度的乙醇诱导 24 h可以引起 L02 细胞大量坏死。H2O2 模型组、APAP 模型组和乙醇模型组的细胞存活率、SOD 活性均低于正常对照组（均P＜0.05），而 ALT、AST、MDA 含量均高于正常对照组（均P＜0.05）。结论 分别用 300μmol/L H2O2 诱导 6 h、40 mmol/L APAP 作用 3 h 和 1.5%的乙醇作用 6 h 的 L02 肝细胞所形成的肝损伤模型比较稳定，是体外模拟氧化性、药物性和酒精性肝损伤模型的最佳诱导条件。

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